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多功能DNA純化回收試劑盒的基本原理介紹
發(fā)布日期:
2018-06-21
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DNA純化回收技術(shù)是分子生物學(xué)實驗中重要的組成部分,多功能DNA純化回收試劑盒目前已被廣泛應(yīng)用于PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗后的產(chǎn)物純化與濃縮。
多功能DNA純化回收試劑盒的原理是在特定溶液環(huán)境下(高鹽、低pH)使核酸吸附在固相介質(zhì)(一般是硅膠膜)上,洗滌去除雜質(zhì)后,通過改變?nèi)芤涵h(huán)境使DNA溶解到純水或TE(低鹽、高pH)中進(jìn)行洗脫,可去除PCR反應(yīng)中的dNTPs、引物、礦物油和聚合酶等及DNA樣本中的其它雜質(zhì),得到的DNA片段可用于酶切、連接、測序、PCR反應(yīng)模版等后續(xù)操作。
目前的多功能DNA純化回收試劑盒主要有離心柱型和磁珠型兩種,離心柱型主要是通過將硅膠膜固定在離心管中,讓含有核酸的溶液用離心力或者負(fù)壓讓液體通過硅膠膜,使核酸在特定溶液環(huán)境中吸附在硅膠膜上,經(jīng)過洗滌、洗脫等步驟得到純的核酸。目前大多數(shù)的生物試劑公司生產(chǎn)的回收試劑盒主要是采用該方法來回收核酸,這種方法操作簡單、時間短。目前也有很多公司采用磁珠法來提取,不需要離心,可以用于自動化操作。