快速蛋白質(zhì)染色劑為一種單組分染色劑,可直接對(duì)凝膠上分離的蛋白進(jìn)行染色,用于SDS--PAGE凝膠、非變形PAGE凝膠,或argose膠的快速染色,在清晰背景上產(chǎn)生靈敏度0.5nChemicalbookg以上蛋白質(zhì)的藍(lán)色條帶的經(jīng)典的技術(shù)方法。本方法不需要甲醇、乙醇的固定和脫色。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,敏感度高,顯色清晰,重復(fù)性好得到非常廣泛的使用。安全信息快速蛋白質(zhì)染色劑是生物學(xué)常用的試劑之一,不僅可以用于直觀地監(jiān)測(cè)SDS-PAGE電泳的進(jìn)程,評(píng)估PVDF、尼龍和硝酸纖維素膜的轉(zhuǎn)移效率、還可以用于計(jì)量蛋白質(zhì)的大致分子量。
1、配制FlashStain(5X)存儲(chǔ)液:將一份FlashStainPowder(for10L)粉劑加入920ml去離子水,攪拌至溶解后再加入1000ml85%磷酸,攪拌均勻即可。該存儲(chǔ)液可在室溫下穩(wěn)定保存1年,或在4°C保存2年。
2、配制FlashStain(1X)染色液:將FlashStain(5X)存儲(chǔ)液用去離子水稀釋至1X,混勻即可。稀釋后的染色液可在室溫下保存至少3個(gè)月。保存過程中產(chǎn)生沉淀為正?,F(xiàn)象,使用前搖勻即可。
3、使用FlashStain(1X)染色液:每塊不超過10x10cm大小的PAGE膠建議用量為30-50ml染色液。先將PAGE膠用去離子水清洗數(shù)次,然后轉(zhuǎn)入含有染色液的容器中,置于水平搖床上顯色。當(dāng)目的條帶顏色達(dá)到理想效果時(shí),倒掉染色液。
在蛋白質(zhì)染色方法中,考馬斯亮藍(lán)染色為常用,它克服了氨基黑染色靈敏度不高的限制,又比銀染簡便易操作??沙R?guī)方法需使用劇毒的甲醇和強(qiáng)刺激性的乙酸,難為了一眾小白們。